貨號(hào)：69104 植物基因組DNA小提試劑盒 (50)
英文名稱：DNeasy Plant Mini Kit (50)
中文名稱：植物基因組DNA小提試劑盒 (50)
品 牌：Qiagen
貨 號(hào)：69104
從植物細(xì)胞、組織或真菌細(xì)胞樣本中分離總DNA，產(chǎn)量可達(dá)30 μg
高純度DNA，無污染物和酶抑制劑
快速純化得到即用型DNA
無需有機(jī)抽提，無需乙醇沉淀
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DNeasy Plant Mini Kit通過基于硅膠膜的離心柱形式，可快速便捷的純化DNA。常規(guī)產(chǎn)量為3–30 μg高品質(zhì)DNA，產(chǎn)量取決于樣本來源。DNeasy Plant Mini Kit的DNA純化過程可在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上自動(dòng)化進(jìn)行。
特點(diǎn)
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參數(shù)
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應(yīng)用
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PCR, real-time PCR, blotting
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洗脫體積
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50–400 μl
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規(guī)格
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Spin column
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主要樣本類型
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Plant samples
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處理
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Manual
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純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白
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DNA
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樣本量
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<100 mg
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技術(shù)
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Silica technology
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每次運(yùn)行或制備時(shí)間
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<1 hour
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產(chǎn)量
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3–30 μg
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性能
DNeasy Plant Maxi Kit可快速高效的純化高品質(zhì)DNA，可以從不同種類的植物和組織樣本中進(jìn)行純化，包括較難處理的樣本來源（參見下表）。樣本可以是新鮮、冷凍或者風(fēng)干的。優(yōu)化的DNeasy Plant操作流程與QIAshredder Maxi離心柱結(jié)合使用，獨(dú)特的過濾和勻質(zhì)柱，能夠有效的去除細(xì)胞碎片并且優(yōu)化裂解后的樣本處理流程。
幼葉或針葉（以及其他組織，如上）收集并立即速凍。使用DNeasy Plant Mini Kit進(jìn)行DNA提取。1山毛櫸、2干葉、3愈傷組織、4年植物上的葉子、5胚乳、6富含碳水化合物的老樹葉、7芽。包括真菌在內(nèi)的其他物種的DNA提取的詳細(xì)信息，請(qǐng)聯(lián)系QIAGEN公司的技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐慕?jīng)銷商。
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用DNeasy Kits處理的植物種類簡(jiǎn)表Abies alba（銀杉）
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Nicotiana tabacum（煙草）
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Aesculus hippocastanum（七葉樹）
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Oryza sativa（水稻）4
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Arabidopsis thaliana（擬南芥）
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Pelargonium sp.（天竺葵）4
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Avena sp.（燕麥）
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Petunia sp.4
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Brassica napus（油菜）
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Pinus sylvestris（歐洲赤松），P. brutia5
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Brassica oleracea（大頭菜）
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Populus tremula（白楊）
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Chicorium endivia（菊苣）
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Pseudotsuga menziesii（Douglas 冷杉）
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Citrullini lanatus（西瓜）
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Quercus robur, Q. petrea（橡樹）6,7
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Egeria sp.
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Rhododendron sp.2,4
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Fagus sylvatica（櫸木）1
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Rubus idaeus（覆盆子）
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Helianthus spp.（向日葵）
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Solanum tuberosum（土豆）
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Hordeum vulgare（大麥）2
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Sphagnum palustre（苔）
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Humulus sp.（酒花）
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Spinacia oleracea（菠菜）
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Hydrilla sp.
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Taxus baccata（紅豆杉）
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Kalanchoe spp.
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Triticum aestivum（小麥）4
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Lupinus sp.
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Ulmus glabra（榆樹）6
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Lycopersicon esculentum（番茄）3
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Vitis spp.（葡萄）6
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Myriophyllum sp.
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Zea mays（玉米）
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常規(guī)產(chǎn)量為3–30 μg，樣本量達(dá)100 mg濕重，洗脫體積為50–400 μl。DNA產(chǎn)量因種類和組織的不同而不同，取決于基因組大小、倍體、細(xì)胞數(shù)量和組織樣本的年齡。較低和較高的范圍值分別對(duì)應(yīng)擬南芥和小麥。
DNeasy Plant操作流程制備純核酸，無多糖和其他使用常規(guī)方法純化產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物。這些雜質(zhì)可能會(huì)干擾分光讀數(shù)并抑制酶反應(yīng)。DNeasy純化的DNA的吸光度掃描在260 nm處顯示對(duì)稱峰（參見DNA purity from pine needles），證明DNA無酶抑制劑等雜質(zhì)。DNeasy純化的DNA最長(zhǎng)為40 kb（參見Pure DNA）。純化的DNA可用于多種應(yīng)用（參見PCR analysis和RAPD analysis）。
原理
DNeasy Plant Kits使用先進(jìn)的硅膠膜技術(shù)和簡(jiǎn)單的離心操作流程從植物組織和細(xì)胞或者真菌中提取高純度的細(xì)胞總DNA。DNeasy技術(shù)取代繁瑣的DNA提取操作流程，如十六烷基三甲基溴化銨（CTAB）、苯酚或者氯仿萃取。使用DNeasy操作流程不需要乙醇沉淀，純化的DNA可以直接使用。DNeasy樣本制備技術(shù)已經(jīng)過認(rèn)證。
操作流程
首先對(duì)樣本進(jìn)行機(jī)械攪拌，然后進(jìn)行化學(xué)裂解（參見DNeasy Plant and DNeasy 96 Plant procedures）。在裂解過程中，RNA被RNAase消化去除。細(xì)胞碎片、沉淀的蛋白質(zhì)和多糖都被去除，并且樣本通過QIAshredder Maxi離心柱并離心實(shí)現(xiàn)勻漿。調(diào)節(jié)緩沖溶液條件，并將裂解產(chǎn)物上樣到DNeasy Plant Maxi離心柱中。在短暫的離心過程中，DNA選擇性結(jié)合到硅膠膜上，污染物通過。余下的污染物和酶抑制劑經(jīng)過一或者兩步高效的洗滌步驟去除。然后，用水或者低鹽緩沖溶液將純化的DNA洗脫，待用。
應(yīng)用
DNeasy Plant Mini Kit適用于從植物組織中純化DNA，包括：
植物細(xì)胞
植物組織
真菌